OBSERVAÇÃO DE MICORRIZAS

Material:

Paletas (godés);
Água destilada;
Azul de Toluidina (0.5%);
Molibdato de amónia (Ma - primeira paleta);
Álcool 70%;
Álcool 80%;
Álcool 90%;
Álcool 95%;
Álcool 100%;
Álcool 100%: xilol;
Xilol;

Procedimento:

Efetuou-se cortes finos das raízes das plantas com um bisturi;
Corou-se os cortes, submetendo-os à ação sequencial dos reagentes em baixo especificados e respeitando os tempos indicados. Os recipientes podem estar em godés (o que foi o caso) ou em vidros de relógio sendo que a transferência do material biológico deve ser efetuada com uma pinça:

Imergiu-se os cortes em azul de toluidina - 10 minutos;
Lavou-se os cortes em água destilada - 2 a 3 mudas;
Imergiu-se os cortes em molibdato de amónia - 8 minutos;
Efetuou-se uma lavagem rápida em água destilada;
Desidratou-se os cortes, transferindo-os para godés com álcoois sucessivamente mais concentrados:

- álcool 70%; - álcool 100%;

- álcool 80%; - álcool 100%: xilol (1:1);

- álcool 90%; - Xilol.

- álcool 95%;

As imagens que se seguem são de autoria: Jéssica Constantino.

Fig 37: Azul de Toluidina (o.5%)

Fig 38: Água destilada

Fig 39: Primeira paleta

Fig 40: Segunda paleta

Fig 52: Paleta 1

Fig 53: Paleta 2

Fig 54: Depois de ter passado o material por todas as soluções passou-se algum desse material para uma lâmina sendo depois coberto o mesmo por uma lamela.

Fig 41: Azul de Toluidina.

Fig 42: Água destilada (primeira molha)

Fig 43: Água destilada (segunda molha)

Fig 44: Molibdato de amónia

Fig 45: Água destilada

Fig 46: Álcool 70%

Fig 47: Álcool 80%

Fig 48: Álcool 90%

Fig 49: Álcool 95%

Fig 51: Xilol

Fig 50: Álcool 100% Xilol (1:1)

Fig 55: Micorrizas observadas ao microscópio - ampliação 100x

Fig 56: Micorrizas observadas ao microscópio - ampliação 100x

Fig 57: Micorrizas observadas ao microscópio - ampliação 100x

Fig 58: Micorrizas observadas ao microscópio - ampliação 100x

Fig 59: Micorrizas observadas ao microscópio - ampliação 100x

Fig 60: Micorrizas observadas ao microscópio - ampliação 100x

Conclusão:

Na natureza, as orquídeas utilizam obrigatoriamente fungos endomicorrízicos para a germinação de sementes e desenvolvimento da plântula, ao menos nos primeiros estádios do seu ciclo de vida. Assim, fungos micorrízicos associados ao sistema radicular de orquídeas nativas vêm sendo isolados, caraterizados e armazenados para uso em futuros programas de conservação de espécies de orquídeas, por meio da germinação simbiótica.

O termo de micorriza aplica-se à associação simbiótica de plantas com alguns fungos do solo. As micorrizas em suas diferentes associações cumprem um papel importante no desenvolvimento e crescimento das plantas hospedantes; as associações estão diretamente influenciadas dependendo da espécie e do fungo da planta, o tipo de solo e sua interação.

Bibliografia